欧美AV蜜桃一区二区蜜桃,插我舔内射18免费视频,久久久久人妻一区精品色,欧美人禽性动交异族另类

銷(xiāo)售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 測(cè)定用乙醇固定的 DNA 的含量

    測(cè)定用乙醇固定的 DNA 的含量

    發(fā)布時(shí)間: 2021-12-17  點(diǎn)擊次數(shù): 976次

    原理

    DNA和RNA在260nm處有一很高的吸收峰,利用這個(gè)原理我們測(cè)其OD260,再推算出其濃度。

    材料與儀器

    細(xì)胞樣品
    PBS緩沖液 70%乙醇 PI液
    離心機(jī) 恒溫箱 篩網(wǎng)

    步驟


    一、培養(yǎng)細(xì)胞的 DNA 含量的測(cè)定


    制備單細(xì)胞懸液于 200μ l 的 PBS 緩沖液中; 加入 2ml 預(yù)冷的 70%乙醇,4℃保存;


    1. 取單細(xì)胞懸液 1——2×106 個(gè)細(xì)胞于 PBS(PH=7.2)緩沖液中;


    2. 300g 離心 5 分鐘,棄上清,反復(fù)兩次;


    3. 重懸細(xì)胞于 0.5ml PBS 緩沖液中;


    4. 將細(xì)胞懸液放置于 2——3ml 冷 70%乙醇中,混勻,保存于4℃,至少30 分鐘。 在 4℃條件下可保存 2——3 周。


    2、新鮮組織的 DNA 含量的測(cè)定


    1. 用 200mg 濕重組織用機(jī)械法制成單細(xì)胞懸液;


    2. 500g 離心 5 分鐘;


    3. 棄上清,重懸于 10ml 染色- 去污劑中;


    4. 再過(guò)濾,用 200 目的篩網(wǎng)或 70——80μm 的篩網(wǎng)過(guò)濾;


    5. 上機(jī)檢測(cè)。


    3、石蠟包埋組織切片的 DNA 含量的測(cè)定


    1. 從石蠟包埋切取切片 50 μ m 厚,2——3 片,制成單細(xì)胞懸液;


    2. 用 PBS 緩沖液洗滌,500g 離心 5 分鐘,棄上清;


    3. 加入 PI 液 1ml 室溫避光 30 分鐘;


    4. 調(diào)整細(xì)胞濃度為 1×106/ml;


    5. 上機(jī)檢測(cè)。


    注意事項(xiàng)

    1. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求,固定劑也可選用 1——3%多聚甲醛;


    2. 將乙醇作為固定劑時(shí),乙醇應(yīng)預(yù)冷至 0——4℃;


    3. 細(xì)胞在固定時(shí),固定劑應(yīng)緩慢滴入細(xì)胞懸液中,使固定劑的濃度緩慢增 加,并不斷震搖,以免細(xì)胞成團(tuán)(特別是用乙醇固定時(shí)) .


    常見(jiàn)問(wèn)題

    如果想要檢測(cè)樣品的純度,那么還要再測(cè)一次280nm處OD值,計(jì)算二者的比率,若比率接近2,說(shuō)明樣品純度較高。

    以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


    安培生物科技有限公司介紹:

    安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專(zhuān)注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。



    下一篇:乙醇沉淀法
    上一篇:BSP克隆測(cè)序法
產(chǎn)品中心 Products